摘  要：探讨了铬天青S与维生素B12的缔合反应，建立了简便、快速、灵敏的测定维生素B12的双波长吸收光谱法。在酸性溶液中，铬天青S与维生素B12发生缔合反应生成离子缔合物，产生1个强度较大的正吸收峰和1个强度较大的负吸收峰，正吸收峰位于514 nm，负吸收峰位于410 nm，它们的线性范围为0.062～13.6 mg/L，检出限分别为0.062 mg/L（正吸收）和0.058 mg/L（负吸收），表观摩尔吸光系数（ε）分别为1.52×105 L/(mol·cm)（正吸收）和1.07×105 L/(mol·cm)（负吸收）。当用双波长法测定时，ε为2.59×105 L/(mol·cm)，检出限为0.030 mg/L。将灵敏度最高的双波长法用于药物中维生素B12的测定，结果满意。